细胞凋亡

细胞凋亡是细胞主动实施的一种程序性死亡，是细胞的基本特征之一，它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面起着十分重要的作用。在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。

检测方法

    WB检测相关蛋白、流式上机检测、Tunuel染色以及荧光拍照/共聚焦拍照

实验原理

AnnexinⅤ是一种分子量为35-36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的PS高亲和力特异性结合。因此AnnexinV作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将AnnexinⅤ进行荧光素FITC标记，以标记了的AnnexinV作为荧光探针，利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。碘化丙锭（PropidiumIodide,PI）是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但对凋亡中晚期的细胞和死细胞，PI能够透过细胞膜使细胞核染红。因此将AnnexinV与PI匹配使用，就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。

注意事项

1、 AnnexinV是光敏物质，在操作时要注意避光。

2、 荧光显微镜下观察细胞时，由于荧光易碎灭，观察时要尽量快。

3、 整个操作过程动作要尽量轻柔，切勿用力吹打细胞。