服务详情
| 服务项目 | 实验内容明细 | 实验周期 | 客户提供 | 交付结果 |
| Co-IP检测 | 细胞培养与处理 | 10个工作日 | 细胞株 | 原始数据、实验报告 |
| 免疫共沉淀 | 提供实验所用到的试剂 | |||
| Western Blot检测(不提供抗体) | 目标抗体 |
常见问题解答
注意事项
1. 细胞裂解采用温和的裂解条件,不能破坏细胞内存在的所有蛋白质-蛋白质相互作用,多采用非离子变性剂(NP40 或Triton X-100)。每种细胞的裂解条件是不一样的,通过经验确定。不能用高浓度的变性剂(0.2%SDS),细胞裂解液中要加各种酶抑制剂,如商品化的。
2. 使用明确的抗体,可以将几种抗体共同使用。
3. 使用对照抗体:
单克隆抗体:正常小鼠的IgG或另一类单抗
兔多克隆抗体:正常兔IgG
4. 确保共沉淀的蛋白是由所加入的抗体沉淀得到的,而并非外源非特异蛋白,单克隆抗体的使用有助于避免污染的发生。
5. 要确保抗体的特异性,即在不表达抗原的细胞溶解物中添加抗体后不会引起共沉淀。
6. 确定蛋白间的相互作用是发生在细胞中,而不是由于细胞的溶解才发生的,这需要进行蛋白质的定位来确定。