CCK-8

一、运输与存储条件

本产品低温运输，4 ℃密封避光保存，有效期2年。

二、注意事项（请使用试剂盒前阅读此注意事项）

1.  如果吸光度值偏低，则适当增加细胞数量，并适当延长CCK-8孵育时间。

2.   测定吸光度值前应确保每个孔内没有气泡，否则会干扰测定，吸光度值会异常。

3.   请测定450 nm处吸光度值，若无450 nm滤光片，可以使用420-480 nm的滤光片。

4.   若连续多天测定培养细胞的吸光度值，请保持每次CCK-8孵育时间的一致，避免因孵育时间不同而导致吸光度值偏差。

三、产品简介

Cell Counting Kit-8，简称CCK-8，主要成份是四唑盐WST-8，可以被线粒体内的脱氢酶还原生成水溶性的formazan，其颜色深浅程度与细胞数量呈正比。因此，CCK-8试剂常用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等实验。

四、特点与优势

1.  本试剂为增强型CCK-8检测试剂，灵敏度高，可以检测到的细胞数量下限为1,000 个/孔。

2. 本试剂经脱氢酶作用产生水溶性的formazan，使培养液变成橙黄色，可以直接测定其OD值。

3.  CCK-8细胞毒性低，加入细胞培养液后，可以在孵育后的不同时间点测定OD值，以便寻找最佳孵育时间。

五、使用说明

1.    细胞培养。胰酶消化法收集细胞，计数并重悬细胞，加入96孔板，100 μL/孔，并设置只加细胞培养液，不加细胞的孔，作为空白对照。每个实验组和空白对照组至少设置3个重复孔，以便测得的OD值可以做统计分析。

2.    CCK-8孵育。在细胞培养液中加入CCK-8试剂，10 μL/孔，轻轻震荡，混匀，继续培养。

3.    吸光度值检测。CCK-8加入后不同时间点（0.5h，1h，2h），利用酶标仪检测450 nm处吸光度值（OD值），选取最佳OD值做统计分析。

4.    细胞存活率计算：

细胞存活率 (%)=([A(加药)-A(空白)]/A(对照)-A(空白)])×100

A(加药)：药物处理细胞的吸光度值

A(空白)：利用培养液作为空白对照孔的吸光度值。

A(对照)：正常生长细胞的吸光度值

六、常见问题与分析。