产品编号 | 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
Omt-06 | 5 × 细胞裂解液 （5 × Cell Lysis Buffer） | 20 ml | -20 ℃ 2年 |
萤火虫荧光素酶检测试剂 (Firefly Luciferase Detection Reagent) | 10 ml | -80 ℃ 2年 | |
海肾荧光素酶检测底物（50 ×） （Substrate for Renilla Luciferase Detection） | 0.2 ml | -80 ℃ 2年 | |
海肾荧光素酶底物稀释液 (SFAR Buffer) | 15 ml | -20 ℃ 2年 | |
说明书 | 1份 |
问题 | 可能原因 | 解决方案 |
荧光素酶活性值偏低 | 细胞转染效率低，luciferase表达水平偏低。 | 增强细胞转染效率，或更换成转染效率较高的的细胞株，如293T细胞。 |
裂解产物使用量偏少 | 增加检测体系中的细胞裂解产物用量。 | |
细胞裂解不充分。 | 请用配制的1×细胞裂解液裂解细胞30 min，裂解过程中不断震荡。 | |
荧光素酶活性检测试剂失效。 | 请正确保存和使用试剂盒。 | |
荧光素酶活性检测试剂反复冻融。 | 萤火虫荧光素酶检测试剂分装成100 μl/tube，-80 ℃保存。尽量使用新鲜配制的海肾荧光素活性检测试剂，配好暂时不用的置于-80 ℃存放，避免反复冻融。 | |
重复测量的荧光素酶活性值偏差大 | 样品和检测试剂未平衡到室温。 | 提前取出样品和分装的萤火虫荧光素酶检测试剂，并配制海肾荧光素酶检测试剂，室温避光放置几分钟，平衡到室温后，再开始检测。 |
样品加样量不准。 | 使用精确度较高的移液器，保证加样量，混合次数及间隔时间一致。 | |
检测试剂不是同一批次配制的荧光素酶活性检测试剂。 | 反复冻融降低检测试剂的灵敏度，因此，检测同一样品时，使用同一批次配制，且没有反复冻融的萤火虫和海肾荧光素酶活性检测试剂。 | |
荧光素酶活性值偏高 | 细胞转染效率高，luciferase表达量高。 | 减少细胞裂解产物用量，或用1×细胞裂解液稀释细胞裂解产物后再测定。 |
细胞裂解产物用量偏大。 | 减少测定体系中的细胞裂解产物用量。 |